Иммуноферментный анализ (ELISA, англ. enzyme-linked immunosorbent assay) является одним из основных методов лабораторной диагностики в медицине. Он позволяет определить наличие или количество антител или антигенов в биологической жидкости пациента.
Принцип работы иммуноферментного анализа основывается на взаимодействии антител и антигенов и использовании химического ферментного катализа для детектирования этого взаимодействия. В основе метода лежит специфическое связывание антител с антигенами и образование иммунного комплекса. Затем наличие образовавшегося комплекса антител-антиген обнаруживается путем добавления фермента, который приводит к образованию колориметрического продукта, отражающего количество образовавшегося комплекса.
Преимущества иммуноферментного анализа включают высокую чувствительность и специфичность. Он может быть использован для определения различных показателей иммунного ответа, таких как уровень антител, активность ферментов, присутствие определенных мутаций и многое другое. Поэтому этот метод широко применяется в клинической практике для диагностики различных заболеваний, включая инфекционные, аутоиммунные, онкологические и другие патологические состояния.
Основные этапы иммуноферментного анализа включают покрытие пластинки, содержащей ячейки, антителами, специфичными для интересующего антигена. Затем происходит добавление образца биологической жидкости пациента, содержащей антигены. В случае наличия антигена, он связывается с антителами на пластинке. После этого следует небольшое измывание, чтобы удалить непривязанные молекулы и добавление вторичного антитела, помеченного ферментом. В результате взаимодействия вторичного антитела и комплекса антител-антигенов образуется субстрат для фермента. Затем происходит детектирование реакции с помощью специальных методов, например, спектрофотометрии, чтобы определить количество образовавшегося продукта и, следовательно, сделать вывод о наличии или количестве исследуемой молекулы.
Важно отметить, что эффективность иммуноферментного анализа зависит от качества использованных реагентов, а также от правильности выполнения каждого этапа процедуры. Наличие примесей, неправильное обращение с образцами или дефекты в процессе могут привести к неверным результатам. Поэтому лабораторные испытания с использованием иммуноферментного анализа должны проводиться в соответствии с определенными стандартами качества.
Хотя иммуноферментный анализ имеет определенные ограничения, такие как возможность ложноположительных или ложноотрицательных результатов, этот метод остается одним из самых широко используемых и надежных способов диагностики в медицине. Он помогает в определении наличия инфекций, мониторинге эффективности лечения, скрининге и выявлении риска развития различных заболеваний. Поэтому иммуноферментный анализ с успехом применяется как в обычной клинической практике, так и в исследовательских лабораториях для улучшения диагностики и лечения пациентов.
